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                  HJ 1215-2021 水質 浮游植物的測定 濾膜-顯微鏡計數法

                  1 適用范圍

                        本標準規定了測定水中浮游植物的濾膜-顯微鏡計數法。本標準適用于地表水中浮游植物的快速測定。

                        當樣品最大過濾體積為 1000 ml 時,方法檢出限為 40 cells/L。方法檢出限計算方法詳見附錄 A。

                  2 規范性引用文件

                        本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是注明日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本標準。凡是未注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本標準。

                        GB/T 14581 水質 湖泊和水庫采樣技術指導

                        HJ/T 91 地表水和污水監測技術規范

                        ?HJ 494 水質 采樣技術指導

                  3 術語和定義

                        下列術語和定義適用于本標準。

                  3.1

                        浮游植物 phytoplankton

                        在水中營浮游生活的微小藻類植物,通常浮游植物就是浮游藻類,包括原核的藍藻和其它各類真核藻類。

                  3.2

                        計數單位 counting unit

                        顯微鏡視野下選擇計數的最小單元,如細胞。

                  3.3

                        浮游植物密度 density of phytoplankton

                        單位體積內浮游植物的細胞數,cells/L。

                  3.4

                        顯微鏡計數視野 microscope counting field

                        顯微鏡視野中限定一定面積的區域,用來定量計數浮游植物。

                  4 方法原理

                        樣品通過一定孔徑的濾膜,群體、絲狀體及單細胞浮游植物截留在濾膜上,濾膜經透明處理后在顯微鏡下鏡檢。

                  5 試劑和材料

                        除非另有說明,分析時均使用符合國家標準的分析純試劑,實驗用水為新制備的去離子水或蒸餾水。

                  5.1 碘(I2)。

                  5.2 碘化鉀(KI)。

                  5.3 甲醛溶液:w(HCHO)37%40%。

                  5.4 魯哥氏碘液:

                        稱取 60 g 碘化鉀(5.2)溶解在 100 ml 水中,再加入 40 g 碘(5.1),充分攪拌使其完全溶解,加水定容至 1000 ml,轉移至棕色磨口玻璃瓶,室溫避光保存。

                  5.5 顯微鏡浸沒油:nD23=1.515 nE23=1.518,配透明玻璃滴棒。

                  5.6 濾膜:混合纖維素酯膜,直徑 25 mm,孔徑 0.45 μm3 μm。

                        注:每批次濾膜應進行水化測試和油透明測試,滿足可水化和可透明要求后方可使用。將 1 張未使用的濾膜放入盛水的燒杯中,若濾膜被水完全浸潤,則濾膜可水化。取 1 張未使用的濾膜,置于滴有顯微鏡浸沒油的載玻片上, 若濾膜被浸沒油完全浸潤,則濾膜可透明。

                  6 儀器和設備

                  6.1 25 號浮游生物網:網孔直徑 0.064 mm,網呈圓錐形,網口套在銅環上,網底端有出水開關活塞。

                  6.2 定性采樣瓶:30 ml100 ml 廣口聚乙烯瓶。

                  6.3 采水器:不銹鋼或有機玻璃材質,圓柱形。容量和深度規格要滿足采樣要求。

                  6.4 定量采樣瓶:1 L2 L 廣口聚乙烯瓶。

                  6.5 冷藏箱。

                  6.6 真空抽濾裝置:包括漏斗(直徑 25 mm,容積 200 ml)、多孔聚酯濾膜支撐板、收集瓶、真空泵(相對真空度≤-17 kPa,可調)。

                  6.7 載玻片:25 mm×76 mm。

                        注:載玻片和蓋玻片使用前應用濃鹽酸和乙醇浸泡。若條件允許,選擇可直接使用的載玻片或蓋玻片。

                  6.8 蓋玻片:25 mm×25 mm。

                  6.9 無齒組織鑷子。

                  6.10 載玻片晾片板:適配同規格載玻片。

                  6.11 烘箱:70 ℃±2 ℃,溫度可調。

                  6.12 正置生物顯微鏡或倒置生物顯微鏡:物鏡 4×、10×、20×、40×;目鏡 10×或 15×。

                  6.13 載物臺測微計:又稱鏡臺測微計,1 mm/100 DIV,分劃值為 0.01 mm。

                        注:DIV 指等分格,1 mm/100 DIV 1 mm 等分成 100 格。

                  6.14 惠普爾目鏡分劃板(Whipple grid):邊長為 7 mm10 mm 的正方形大格,劃分為 100 個相同的正方形中格,位于中央的 1 個中格進一步劃分為 25 個相同的正方形小格。

                        注:不具備惠普爾目鏡分劃板時,亦可使用同規格的網格型目鏡分劃板(即中央的中格未細分為 25 小格的網格型目鏡分劃板)。

                  6.15 計數器。

                  6.16 一般實驗室常用設備。

                  7 樣品

                  7.1 樣品采集

                  7.1.1 定性樣品

                        點位布設及采樣頻次按照GB/T 14581、HJ/T 91 HJ 494 的相關規定執行。

                        使用 25 號浮游生物網(6.1)采集定性樣品。關閉浮游生物網底端出水活塞開關,在水面表層至0.5 m 水深處以 20 cm/s30 cm/s 的速度做“∞”形往復,緩慢拖動約 1 min3 min,待網中明顯有浮游植物進入,將浮游生物網(6.1)提出水面,網內水自然通過網孔濾出,待底部剩少許水樣(5 ml10 ml)時,將底端出口移入定性采樣瓶(6.2)中,打開底端活塞開關收集定性樣品。采集分層樣品時,用 25 號浮游生物網(6.1)過濾特定水層樣品,其他步驟同采集表層樣品。定性樣品采集完成后及時將浮游生物網清洗干凈。樣品采集后放入冷藏箱(6.5)冷藏避光運輸。

                        如有定性樣品采集技術規范,按技術規范有關要求執行。

                  7.1.2 定量樣品

                        按照GB/T 14581、HJ/T 91 HJ 494 的相關規定采集定量樣品。

                        使用采水器(6.3)采集 1 L2 L 樣品至定量采樣瓶(6.4)中。若水體透明度較高,浮游植物數量較少時,應酌情增加采樣體積。定量樣品采集完成后,定量采樣瓶(6.4)不應裝滿,以便搖勻。

                        注 1:有些浮游植物(如藍藻)常上浮在水面或成片、條帶分布,可在此水華密集區域采樣作為峰值參考。注 2:定量樣品采集應在定性樣品采集之前。應保持固定時間段采樣,以便結果之間可相互比較。

                  7.2 樣品保存

                  7.2.1 定性樣品

                        定性樣品采集后應立即加入魯哥氏碘液(5.4)固定,用量為水樣體積的 1.0%1.5%。鏡檢活體樣品不加魯哥氏碘液(5.4)固定。定性樣品在室溫避光條件下可保存 3 周;1 ℃~5 ℃冷藏避光條件下可保存 12 個月?;铙w樣品 4 ℃~10 ℃冷藏避光條件下可保存 36 h。

                  7.2.2 定量樣品

                        定量樣品采集后立即加入魯哥氏碘液(5.4)固定,用量為水樣體積的 1.0%1.5%。也可將魯哥氏碘液(5.4)提前加入定量采樣瓶(6.4)中帶至現場使用。定量樣品在室溫避光條件下可保存 3 周;1 ℃~5 ℃冷藏避光條件下可保存 12 個月。

                        樣品在保存過程中,應每周檢查魯哥氏碘液(5.4)的氧化程度,若樣品顏色變淺,應向樣品中補加適量的魯哥氏碘液(5.4),直到樣品的顏色恢復為黃褐色。

                        注:若樣品需長期保存,應加入甲醛溶液(5.3),用量為水樣體積的4%。

                   

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