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                  GB/T 24800.3-2009 化妝品中螺內酯、過氧苯甲酰和維甲酸的測定 高效液相色譜法


                  4 儀器


                  4.1 液相色譜儀,配有二極管陣列檢測器。

                  4.2 微量進樣器,10μL,

                  4.3 超聲波清洗器。

                  4.4 離心機,大于5 000 r/min,

                  4.5 溶劑過濾器和0.45μm有機過濾膜。

                  4.6 具塞比色管,10 mL。

                  5 測定步驟

                  5.1 樣品處理

                        稱取化妝品試樣約0.2g,精確到0.001g,于10 mL具塞比色管中,加人8mL甲醇,在超聲波清洗器中超聲振蕩20min,冷卻后用甲醇稀釋至刻度,混勻。取部分溶液放人離心管中,在離心機上于 5000r/min離心20min,離心后的上清液經0.45μm有機濾膜過濾,濾液待測定用。

                  5.2 測定

                  5.2.1 色譜條件

                  5.2.1.1 色譜柱:Kromasil C18柱(250 mm×4.6mm內徑,5μm);

                  5.2.1.2 流動相:A:甲醇,B:0.025mol/L磷酸二氫鈉溶液(pH 6.5)(3.9),梯度洗脫條件見表1。 

                  1方法的梯度洗脫條件

                   

                  5.2.1.3 流速:1.0 mL/min;

                  5.2.1.4 柱溫:25℃;

                  5.2.1.5 檢測波長:0~9.50 min,240nm,9. 51 min~13 min,335nm;

                  5.2.1.6 進樣量:10 μL。

                  5.2.2 標準工作曲線繪制

                        分別移取一系列濃度為1 mg/L、2 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、 20 mg/L、 50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L的混合標準工作溶液,按色譜條件(5.2.1)進行測定,以色譜峰的峰面積為縱坐標,對應的溶液濃度為橫坐標作圖,繪制標準工作曲線。

                        標準物質色譜圖參見附錄A的圖A.1。

                  5.2.3 試樣測定

                        用微量注射器準確吸取試樣溶液(5. 1)注入液相色譜儀,按色譜條件(5.2.1)進行測定,記錄色譜峰的保留時間和峰面積,由色譜峰的峰面積可從標準曲線上求出相應的被測物濃度。樣品溶液中的被測物的響應值均應在儀器測定的線性范圍之內。被測物含量高的試樣可取適量試樣溶液用流動相稀釋后進行測定。

                  5.2.4 定性確認

                        液相色譜儀對樣品進行定性測定,進行樣品測定時,如果檢出螺內醋、過氧苯甲酞或維甲酸的色譜峰的保留時間與標準品相一致,并且在扣除背景后的樣品色譜圖中,該物質的紫外吸收圖譜與標準品的紫外吸收圖譜相一致,則可初步判斷樣品中存在螺內酯、過氧苯甲?;蚓S甲酸。必要時,陽性樣品需

                   

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